PreCap Desalting 葡聚糖基質凝膠過濾層析介質填料試劑介紹
PreCap Desalting適用于分子量大于5000Da的蛋白或其他大分子樣品的脫鹽、緩沖液置換或小分子的去除。
PreCap Desalting 葡聚糖基質凝膠過濾層析介質填料試劑裝有1 ml或5 ml Smartdex G-25中。Smartdex G-25系列介質是一類以葡聚糖為基質的凝膠過濾層析 （gel filtration chromatography）介質，其工作原理主要是利用具有網狀結構的葡聚糖凝膠的分子篩作用，根據被分離物質的分子大小不同來進行分離。
表 1. PreCap Desalting 產品性能
項目 | 性能 |
介質 | Smartdex G-25 中 |
粒徑 | 85-260 pm |
最大上樣量 | 10%柱體積 |
脫鹽效率 | >95% |
排阻極限 | Mr 5000 |
保存溫度 | 2-8 °C |
2. 使用說明
2.1緩沖液的準備
所用水和緩沖液在使用之前建議用0.22 pm或0.45 pm濾膜過濾。
平衡液為蛋白脫鹽后，用于保護蛋白的溶液，根據客戶需求自行選擇。
2.2樣品準備
樣品在上樣前建議離心或用0.22 pm或0.45|jm濾膜過濾，減少雜質，防止堵塞柱子。
2.3樣品脫鹽
PreCap Desalting是一種脫鹽預裝柱產品，可以用各種常規的中低壓色譜系統，以AKTA儀器使用為例介紹PreCap Desalting的使用方法。
1） 將系統管道中注滿去離子水。去掉預裝柱上塞，連接至色譜系統，不要旋緊。再折斷預裝柱下口，將預裝柱接到色譜系統中，并旋緊。最后旋緊預裝柱上端的色譜系統接頭。
2） 用3-5倍柱體積的去離子水沖洗出存儲緩沖液。
3） 使用至少5倍柱床體積的平衡液平衡色譜柱。1 ml預裝柱推薦流速0.2 ml/min, 5 ml預裝柱推薦流速為1 ml/mino
4） 利用樣品環上樣。加入10%柱體積的樣品，不足時用平衡液將樣品稀釋至相應體積再上樣。
5） 加入平衡液繼續沖洗，分管收集流穿液，檢測樣品回收率和脫鹽效率。
3. 清洗及保存
如果柱子的流速變慢或者脫鹽效果變差，為除去殘留的雜質，如變性蛋白或脂質等，有時需要對脫鹽柱進行在位清洗。常用的清洗液為
0.1-0.2 M NaOH或非離子型去垢劑。
1） 使用一倍的柱體積0.1-0.2 M NaOH沖洗介質，流速控制在0.2 ml/min左右。
2） 用足夠量的去離子水，沖洗介質，1 ml預裝柱推薦流速0.2 ml/min, 5 ml預裝柱推薦流速為1 ml/min,直至pH值至中性。
3） 用至少三倍柱體積20%乙醇溶液沖洗介質，然后分別蓋上下堵頭和上塞，將介質保存于20%乙醇保護液，置于2-8°C保存。 注：不建議介質多次重復再生和使用。
4.PreCap Desalting 葡聚糖基質凝膠過濾層析介質填料試劑 訂購信息及相關產品
名稱 | 貨號 | 規格 |
SpinDesalt Column | SEC02301 | 50次 |
SEC003C1 | 8.3 ml, 1 支 | |
Prepacked Desalting Column | SEC003C2 | 8.3 ml, 5 支 |
SEC003C3 | 8.3 ml, 20 支 | |
SEC018C11 | 1X1 ml | |
SEC018C51 | 5X1 ml | |
PreCap Desalting | SEC018C15 | 1X5 ml |
SEC018C55 | 5X5 ml | |
SEC018CS | 3X1 ml+1X5 ml |
蘇州阿爾法生物提供的瓊脂糖凝膠介質、葡聚糖凝膠介質等蛋白純化和分離填料以及相關生物試劑。另外還提供、氨酸標簽蛋白親和純化介質、GST-tag蛋白親和純化介質、 MBP-tag蛋白親和純化介質、Biotin-tag蛋白親和純化介質、Strep-tagll標簽親和純化介質、 標簽抗體親和純化介質等標簽蛋白親和層析介質； 離子交換層析 、色譜柱、離子交換層析樹脂、疏水層析介質、 磁性微球等。
