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人骨髓間充質干細胞用什么培養基培養?

 更新時間:2024-07-09 點擊量:359

 人骨髓間充質干細胞Human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,簡稱 HBMSCs)是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細胞,可以分化成多種類型的細胞,如骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞等。在組織工程、再生醫學以及Cell Therapy等領域具有廣泛的應用前景。為了獲得高質量的人骨髓間充質干細胞,選擇合適的培養基至關重要。人骨髓間充質干細胞用什么培養基培養?

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一、人間充質干細胞培養基的選擇

1. 無血清培養基

無血清培養基是指不含有血清的培養基,通過添加適量的生長因子、激素和營養物質等,模擬生物體內的生長環境,從而實現細胞的生長和繁殖。無血清培養基具有以下優點:

1)避免血清中病原微生物的傳播,降低細胞培養過程中的污染風險。

2)避免血清中不同批次間的差異,提高實驗的可重復性。

3)有利于細胞產品的臨床應用,減少血清中潛在過敏原的攝入。

2. 含血清培養基

含血清培養基是指含有血清的培養基,血清中含有豐富的生長因子、激素和營養物質,可以滿足細胞生長的需求。含血清培養基具有以下優點:

1)細胞生長速度快,易于獲得大量細胞。

2)細胞生長狀態穩定,易于培養。

但含血清培養基也存在一定的缺點,如血清來源不穩定、病原微生物污染風險、不同批次間差異較大等。因此,在選擇培養基時,可根據實驗需求和細胞特性進行綜合考慮。

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二、充質干細胞培養基的培養方法

1. 細胞接種

將凍存的HBMSCs從液氮中取出,迅速放入37℃水浴中解凍。解凍后,將細胞懸液離心,去除凍存液,用預熱的培養基洗滌細胞兩次。最后,用適量的培養基重懸細胞,調整細胞密度,接種到培養瓶中。

2. 培養條件

將接種好的細胞放入37℃、5% CO2的培養箱中,靜置培養。根據細胞生長情況,每隔2-3天更換一次培養基。

3. 細胞傳代

當細胞生長至80%-90%匯合時,進行細胞傳代。首先,用PBS洗滌細胞兩次,去除殘留的培養基。然后,用胰酶消化細胞,待細胞間隙增大、細胞變圓時,加入含血清的培養基終止消化。最后,將細胞懸液離心,去除胰酶,用適量的培養基重懸細胞,進行傳代培養。

4. 細胞凍存

將生長狀態良好的細胞用胰酶消化,離心后去除胰酶,用凍存液重懸細胞。將細胞懸液分裝到凍存管中,放入-80℃冰箱過夜,次日轉移至液氮中長期保存。

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三、人間充質干細胞培養基的應用

1. 組織工程

HBMSCs具有多向分化潛能,可以分化為骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞等。在組織工程中,將HBMSCs與生物材料結合,可以構建具有生物活性的組織,如骨組織、軟骨組織等。

2. 再生醫學

HBMSCs可以參與組織的損傷修復,通過細胞移植或局部注射等方法,將HBMSCs應用于臨床治療,如骨損傷、軟骨損傷、心肌梗死等疾病。

3. Cell Therapy

4. HBMSCs具有免疫調節作用,可以用于Cell Therapy,如移植物抗宿主?。?/span>GVHD)、系統性紅斑狼瘡(SLE)等。此外,HBMSCs還可以用于治療神經系統疾病、肝臟疾病等。

人間充質干細胞培養基的選擇和培養方法對HBMSCs的研究和應用具有重要意義。合適的培養基可以保證細胞的高質量生長,為后續實驗和應用提供可靠的基礎。

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